以下转自公众号小花晒太阳

“*如果没有其它数据，只有LD50数据，则可基于LD50数据计算HBEL。使用以下公式计算NOEL，使用所得结果建立HBEL。”

图片

APIC清洁验证指南列了上式，这可能是用LD50计算PDE的来源

LD50 ：研究短期内的药物毒性与给药剂量之间的关系

PDE ：在长期暴露于某一物质而不产生毒性的剂量

用急性毒性计算药物的长期毒性显然不适用，EMA问答：LD50 并不适合作为确定 HBEL（通常参考PDE或ADE）的起点。

“Q10, Is the uise of LD50 to determine Health-Based Exposure Limits for drug products acceptable?

A: No, LD50 is not an adequate point of departure to determine a HBEL fordrug prodycts ”

案例二硫化碳PDE(注射剂)计算过程

PDE计算公式参考ICH Q3C，F1/F2/F3/F4/F5的定义略，体重取50kg

PDE是由大多数相关动物研究中的未观察到作用水平(NOEL)或观察到作用的最低水平(LOEL)得出的，如下:

图片

LOEL：观察到作用的最低水平/ “lowest-observed effect level”缩写 

NOEL：未观察到作用水平/ “no-observed-effect level”缩写 

用bing搜索EPA文献（美国环境保护局）

图片

见下图，下载PDF

图片

二硫化碳NOEL（胎儿毒性/畸形）为11.0 mg/kg/day

I.A.1. Oral RfD Summary

Critical Effect

Experimental Doses*

UF

MF

RID

Fetal toxicity/malformations

Rabbit Inhalation

Teratogenie Study

Hardin et al., 1981

NOEL: 20 ppm (62.3mg/cu.m) converted to11.0 mg/kg/day

LOAEL: None

1001

1E-1

mg/kg/day

毒性实验相关信息

L.A.2. Principal and Supporting Studies (Oral RfD)

Hardin, B D.. GP. Bond, MR. Sikor, F.D, Andrew, R.P. Beliles and R.w. Niemeir. 198lTesting of selected work place chemicals for teratogenic potential. Scand. J. Work Environ.Health. 7(Suppl. 4): 66-75.

The data reported in this study were generated at Litton Bionetics, Maryland (under contract toNIOSH). Rats and rabbits were exposed to 20 ppm or 62.3 mg/cu.m (recommended occupation?exposure limit) and 40 ppm or 124.6 mg/cu.m of carbon disulfide (CS2) during the entire lengtlof the pregnancy period and also 34 weeks before breeding to simulate occupational exposure.

Hardin et al. (1981) observed no effects on fetal development in rats or rabbits followinginhalation exposure to 62.3 or 124.6 mg/cu.m, which corresponds to estimated equivalent oraldosages of 5 and 10 mg/kg for rats, and 11 and 22 mg/kg for rabbits. The highest NOEL firomthis study, 22 mg/kg for the rabbit, should not be used for an RfD estimate because.adverseeffects were seen in rabbit fetuses following oral exposure of pregnant does to 25 mg/kg.

实验动物为大鼠和兔子，用大鼠外推到人（更保守），F1为5

F1=5， 大鼠；F1=12，小鼠；F1=2，狗；F1=2.5，兔；F1=3， 猴子；F1=10， 其他动物

F2为10，代表个体间的变异系数

实验周期为34周，34×7=238天。研究时间至少为动物寿命的一半（鼠、兔1年；猫、狗、猴7年），F3为1

F5为1（NOEL：1；NOAEL：1～5；LOEL：5～10）

口服暴露于 25 mg/kg 兔胎中观察到不良反应，F4为5

PDE（口服）=（11.0*50*1000）/（5*10*1*5*1）=2200ug/d

口服外推注射剂，参考FDA以下文字，F6取10，PDF（注射）=220ug/d

Class 1 Verification

~10% of the L&E database(n=60) were used to calculate a chemical specific acceptable daily intake (ADl).  Mainly Class 2 and 3 chemicals (intermediate and hightoxicity) from the Cramer sort

~Employed lCH Q3C/Q3D methods to calculate ADl. Added F6 (10x) to account for oral to parenteral routedifferences

~Statistical analysis of the output to determine acceptable ADI

本品最大日剂量(注射剂)：4g/d

本品二硫化碳的限度为220/4=55ppm

以下不认可的进一步探讨：

图片

这些文章中提到：在没有查询到 NO(A)EL 值时，可以使用半数致死量（LD50）的 1/2000 作为代替。

这样的计算方式看似十分简单、便捷，然而实则是非常不严谨且不被官方认可的。

上图中公式的参考文献主要研究了目前已有的化学物质的 LD50 值与长期毒性试验中的 NOEL 之间的关系。文献中将搜集到的一些药物的 NOEL/LD50 值绘制成如下图像：

图片

从图像中不难发现，LD50 的 1/2000 也并不会低于所有药物的长期试验中的 NOEL 值，根据作者拟合的曲线，可能还有 5% 左右药物的 NOEL/LD50 值低于 1/2000，因此，这种方法计算得出的 NOEL 值的保守性仍然有待商榷。

此外，文献中提到的 NOEL 与 LD50 值均处于经口给药的条件下，所以这篇文献也不能向其他方式给药的药物提供有效的经验。

因此，采用 LD50 推导药品的 NOEL 值并不具备充分的理由。

相关法规解读

诚然，图片中提到的欧盟原料药委员会发布的《原料药工厂中清洁验证指南》中，乃至我国的一些法规与指南中，确实存在关于通过 LD50 计算 PDE 或 HBEL 的相关内容。

只不过，适用于这样的计算方式的情况少之又少。

同样是《原料药工厂中清洁验证指南》，其对于通过 LD50 计算 PDE 的方式还有如下评价：

图片

也就是说，实际上文中提到的通过 LD50 推导 NO(A)EL 的计算方式只适用于少数数据匮乏情况下的估算，属于是无奈之举，不能应用于通常情况下 PDE 的正式计算。

事实上，欧洲药品管理局（EMA）在其发布的 Q&As 中也已经明确表态，LD50 并不适合作为确定 HBEL（通常参考PDE或ADE）的起点。

图片

由此可见，基于 LD50 进行的 HBEL 或 PDE 评估当前并不容易被官方接受。

其实，只要分析了 LD50 与 PDE 的内涵就不难发现，LD50 用于推导 NO(A)EL 作为 PDE 起始点计算的理由是不充分的。

LD50 指的是单次给药后能够杀死一半试验对象的药物剂量，其主要研究的是短期内的药物毒性与给药剂量之间的关系；

而 PDE 计算得出的结果是在长期暴露于某一物质而不产生毒性的剂量，其不仅关注药物毒性与给药剂量之间的关系，还需要关注人体对药物实际的暴露量。

测定 LD50 的研究中缺乏对药代动力学的评估，无从确定动物实际的药物暴露量，同时难以评估药物长期暴露的风险与生殖毒性的风险。

因此，LD50 的数值大小与 NO(A)EL 或 PDE并没有直接数量关系。

衍生阅读：基因毒性杂质判断1.通过基因毒性杂质警示结构结合网站查询判断

图片

1.1通过警示结构判断见附件[1]1.2通过ECHA、CEBS、日本职场安全网站等判断

1.2.1ECHA网站查询

（1）通过网址http://maintenance.echa.europa.eu/进入，输入CAS号或者药物英文名。

图片

图片

（2）点击红框内容进入

图片

图片

（3）点击基因毒性信息--体内基因毒性

图片

（4）查看结果：positive（有基因毒性），negative（无基因毒性）

图片

365站群

1.2.2CEBS网站判断

（1）通过网址https://manticore.niehs.nih.gov/cebssearch进入，输入CAS号或者药物英文名。

图片

（2）点击生物测定基因毒性结论（Bioassay Genetox Conclusion）

图片

（3）输入CAS号进行搜索

图片

（4）查看结果（positive or negative）

图片

1.2.3 日本厚生劳动省（职场安全网站）

通过网址https://anzeninfo.mhlw.go.jp/user/anzen/kag/sokatutbl.htm

直接搜索查看结果。

图片

1.3 CPDB数据库、PubChem数据库查询TD50、LD50计算限度

1.3.1CPDB网站查询TD50

（1）通过网址https://www.toxinfo.io/进入，输入CAS号或者药物英文名。

图片

（2）点击CPDB进入查看结果(TD50)

图片

图片

1.3.2美国国家药品图书馆网站中PubChem数据库查询LD50

（1）通过网址https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/进入，输入CAS号或者药物英文名

图片

（2）点击毒性（toxicity）进入

图片

（3）查看毒性数据（给药方式、实验动物、半数致死量LD50）

图片

2.世界卫生组织国际癌症研究机构致癌物清单、国际癌症中心最新的致癌物文件明确哪些具有致癌性。3.高度关注的危险物质如类黄曲霉素、N-亚硝基化合物和氧化偶氮结构写在最后

随着《药品共线生产质量风险管理指南》的正式实施，我国对于药品共线的生产管理势必更加规范与严格，对于共线生产残留的可接受限度需要更加科学的评估。

作为共线生产残留限度的重要制定依据的 HBEL，药品生产厂家对于生产过程中的相关物质的 PDE 的需求也将越来越高。

然而，无论是 NO(A)EL 的评估还是 PDE 的计算，都需要毒理学家对于目标物质过往的毒理数据经过综合的判断或计算才能得出，对于没有专业背景的人员来说十分困难。

同时，若为注册或检查需要，PDE 评估需要有资质的专业人员才能进行，否则会产生较高的风险。

365建站客服QQ：800083652

因此，若对药品的 PDE 数值有需求，委托专业机构出具 PDE 数值报告是最为稳妥的方式。

每份报告均由多位认证的毒理学家对目标化合物的毒理学性质详细评估与讨论后撰写完成，获得的每一个数值都具有充分依据，是有相关评估需求的企业的可靠选择。

本站仅提供存储服务，所有内容均由用户发布，如发现有害或侵权内容，请点击举报。